[摘要] 目的 探讨C-ski、转化生长因子-β1（TGF-β1）在口腔鳞状癌中的表达及意义。 方法 采用免疫组化SP法检测48例口腔鳞状细胞癌组织和20例口腔正常黏膜组织中C-ski、TGF-β1蛋白的表达情况，并分析C-ski蛋白表达与口腔鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系以及C-ski、TGF-β1两者的相关性。 结果 在正常口腔黏膜组织、口腔鳞状细胞癌组织中，C-ski蛋白表达阳性率分别为40%（8/20）、75%（36/48），两者比较差异有高度统计学意义（P 1.2.3 结果判定C-ski、TGF-β1阳性颗粒均定位于细胞桨中。按切片中显色细胞的阳性比例进行判定，免疫组化染色阳性细胞数≥10%，为阳性（+），阳性细胞数＜10% 阴性（－）。每张切片随机选取20个高倍视野进行观察。
1.3 统计学方法
采用SPSS 11.5软件进行统计学分析，采用χ2检验及Spearman相关系数分析，以P ＜ 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 C-ski蛋白在口腔鳞状细胞癌组织与口腔正常黏膜组织中的表达
结果显示C-ski蛋白阳性颗粒为黄～棕褐色颗粒，主要位于细胞浆内，部分位于细胞膜上。 C-ski蛋白在20例正常口腔黏膜组织中有8例阳性表达（图1），阳性表达率为40%（8/20），C-ski在48例口腔鳞状细胞癌组织中有36例阳性表达（图2），阳性表达率为75%（36/48），两者比较差异有统计学意义（χ2 = 7.573，P = 0.006）。见表1。
2.3 C-ski、TGF-β1蛋白表达之间的关系
TGF-β1蛋白的阳性颗粒为棕褐色，位于细胞浆内。TGF-β1蛋白在20例正常口腔黏膜组织中有6例阳性表达（图3），在48例口腔鳞状细胞癌组织中有33例阳性表达（图4），阳性表达率分别为30%（6/20）和68.8%（33/48），两者比较表达差异有统计学意义（χ2 = 8.667，P = 0.003）。48例口腔鳞癌组织中，C-ski、TGF-β1蛋白表达均阳性者29例，C-ski、TGF-β1蛋白表达均阴性者8例，C-ski阳性而TGF-β1阴性者7例，C-ski阴性而TGF-β1阳性者4例，C-ski蛋白表达与TGF-β1蛋白表达呈正相关（χ2 = 9.341，P = 0.002）。见表3。
表3 C-ski、转化生长因子-β1蛋白表达之间的关系
3 讨论
Ski基因是Stavanezer等[3]于1986年首先在感染了禽类白血病转化缺陷病毒Bratislava77的鸡胚细胞中发现的。人C-ski基因属于ski原癌基因家族，分子量为100KD，由728个氨基酸组成。研究表明Ski蛋白在神经、肌肉发育及器官纤维化方面具重要作用，并且具有促进细胞恶性转化的作用[4]。一些肿瘤，如神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、甲状腺癌、食管癌、前列腺癌及胃癌中，C-ski表达均明显升高[5-6]。笔者的研究结果也显示C-ski蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调（表达率为75%），而在口腔正常黏膜组织中表达较低（表达率为40%），两者比较差异有统计学意义（P = 0.006），笔者还发现C-ski蛋白表达与癌组织的细胞分化程度、肿瘤浸润深度及临床分期无相关性，而与肿瘤有无淋巴结转移相关（P = 0.018），有淋巴结转移者表达高，提示C-ski可能参与口腔鳞状细胞癌的发生、发展。
C-ski由于其没有内在的催化活性，所以必须通过与其他细胞成分如Smad蛋白的相互作用来实现促进细胞恶性转化的功能, 而TGF-β-SmadS转导通路是已知与Ski致瘤作用关系最为密切的家族之一[7]。现代研究表明，TGF-β1对肿瘤具有明显的双向调节功能，在肿瘤发生早期，TGF-β1可作为肿瘤抑制因子起作用，但在肿瘤发展过程中，随着TGF-β1合成增加，TGF-β1对肿瘤发展起促进作用[8]，并在许多恶性肿瘤细胞中均发现有TGF-β1呈高表达。笔者的研究结果结果显示TGF-β1在口腔鳞状细胞癌组织中表达高（表达率为68.6%），而在口腔正常黏膜组织中表达低（表达率为30%），两者比较差异有统计学意义（P = 0.003）。研究结果与蔡传宝等[9]在口腔鳞癌中的研究结果相一致，该结果证实口腔鳞状细胞癌的发生、发展可能与TGF-β1在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调有关，但发生机制还有待进一步去研究。同时笔者采用Spearman相关系数分析在口腔鳞状细胞癌中C-ski与TGF-β1蛋白表达之间的关系发现：C-ski蛋白表达与TGF-β1蛋白表达呈显著正相关（r = 9.341，P = 0.002），该结果证实C-ski在TGF-β信号通路中发挥抑制作用。但C-ski是如何在TGF-β信号通路中发挥抑制作用，至今仍然不是很清楚。笔者认为作用机制可能是通过C-ski和Smad蛋白直接作用，特别是Smad2、Smad3和Smad4，阻断了TGF-β1在细胞内的信号传递通路，使TGF-β1不能与Smad蛋白结合而发挥对增殖细胞的抑制作用，而在肿瘤局部堆积，参与肿瘤的发生发展。He等[10]也报道，Smad2、3、4能和Ski的不同区域结合。突变所有结合区域，能够明显削弱Ski抑制TGF-β诱导的转录活性和细胞周期停滞的能力。并且，突变的Ski与Smad蛋白作用不能诱导鸡胚成纤维细胞的癌性转化。C-ski在TGF-β信号通路中发挥抑制作用的确切机制究竟是什么，还有待进一步去研究。
综上所述，C-ski可能是一个候选的癌基因，在TGF-β信号通路中发挥抑制作用，参与了口腔鳞状细胞癌的发生、发展，为进一步研究口腔鳞状细胞癌的基因治疗，提供了一个潜在的治疗靶点。但C-ski是如何影响TGF-β信号通路、哪些因素参与对C-ski表达的调控以及C-ski与口腔鳞状细胞癌预后的关系都还不十分清楚，尚有待更深入的研究。
[参考文献]
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[9]蔡传宝，陶学金，朱声荣，等. TGF-β1、Endoglin在口腔鳞癌中的表达及意义[J].临床口腔医学杂志，2006，22（12）：718-720.
[10]He J，Tegen SB，Krawitz AR，et al. The transforming activity of Ski and SnoN is dependent on their ability to repressthe activity of Smad proteins [J]. J Biol Chem，2003，278（33）：30540-30547.
（收稿日期：2011-11-21本文编辑：郝明明）