比浊法定量检测血清胃幽门螺杆菌血清抗体的临床意义|幽门螺旋杆菌 比浊法

  [摘要] 目的 讨论比浊法定量检测血清胃幽门螺杆菌抗体(HP-Ab)的临床意义。 方法 通过用比浊法和胶体金法分别检测血清HP-Ab,进行比较,并对比浊法定量检测的测定值> 60 AU/mL的32位体检患者进行HP的分离培养鉴定。 结果 用比浊法和胶体金法分别检测300份体检标本的HP-Ab,比浊法定量检测的阳性、阴性例数分别是100例(33.33%)和158例(52.67%),与胶体金法定性检测的阳性率(107例,35.67%)和阴性率(172例,57.33%)比较,无明显差异(P > 0.05);比浊法定量检测的可疑例数是42例(14.00%),与胶体金定性检测的弱阳性率(21例,7.00%)比较,差异有统计学意义(P 60 AU/mL的32位体检患者组相比,差异无统计学意义(P > 0.05);对照组HP的分离培养鉴定阳性例数、阳性率(2例,6.67%)与比浊定量检测的测定值介于“15~60 AU/mL”的30位体检患者组相比,差异有高度统计学意义(P 60 AU/mL时,高度提示属于HP现症感染。
  [关键词] 胃幽门螺杆菌;比浊法;定量检测;现症感染
  [中图分类号] R573[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210(2012)03(c)-0092-03
  Clinical significance of turbidimetry in quantitative detection of serum Helicobacter Pylori antibodies
  PENG YanLIU Zhiwei
  Department of Laboratory, Shenzhen Xixiang People"s Hospital, Guangdong Province, Shenzhen 518102, China
  [Abstract] Objective To discuss the clinical significance of turbidimetry in the quantitative detection of serum helicobacter pylori antibodies (HP-Ab). Methods Turbidimetry and colloidal gold method were compared in the detection of serum HP-Ab. 32 patients receiving physical examination whose measured values were larger than 60 AU/mL as detected by the turbidimetry received HP separate culture identification. Results The turbidimetry and the colloidal gold method were used to detect the HP-Ab of 300 copies of physical examination specimens respectively. The positive and negative cases of the quantitative turbidimetric detection were 100 cases (33.33%) and 158 cases (52.67%), which were not significantly different from the positive rate (107 cases, 35.67%) and negative rate (172 cases, 57.33%) of the colloidal gold method (P > 0.05). The number of suspicious cases detected by the turbidimetry was 42 (14.00%), which was significantly different from the weak positive rate (21 cases, 7.00%) detected by the colloidal gold method (P 0.05). The number of positive cases and the positive rate (2 cases, 6.67%) of HP separate culture identification of the control group were significantly different from those of the 30 patients receiving physical examination whose measured values were between 15-60 AU/mL as detected by the turbidimetry (P   [Key words] Helicobacter pylori; Turbidimetry; Quantitative detection; Current infection
  目前HP感染诊断常规检测方法有快速尿素酶试验、13C或 14C尿素呼气试验、粪便HP抗原检测、病理学染色检查(如Warrhin-Starry银染、免疫组化染色等)、血清和分泌物(唾液、尿液等)抗体检测和聚合酶链反应等,近年来,应用免疫学方法诊断渐成为研究热点。免疫透射比浊法是利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物,通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法,免疫透射比浊法可以通过仪器的自动化分析得到相应结果,从而克服了人为误差。本文应用比浊法和胶体金法检测在我院体检的300名患者的血清幽门螺杆菌抗体,并对比浊法定量检测的测定值> 60 AU/mL的32位体检患者进行HP的分离培养鉴定。结果报道如下:
  
  1 材料与方法
  1.1 一般材料
  1.1.1 标本来源2011年08月~2011年10月来我院300名体检者,其中,男180例,年龄22~53岁;女120例,年龄23~57岁。
  1.1.2 检测试剂①定性试剂:幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒(胶体金法)由北京康美天鸿生物科技有限公司提供。
  ②定量试剂:幽门螺杆菌快速测定试剂盒(比浊法)由深圳亚辉龙生物科技有限公司提供,并配有标准品,所含HP抗体浓度是40 AU/mL;高值质控物和低值质控物,所含HP抗体浓度分别是30 AU/mL和10 AU/mL;结果的判定:样本值 15 AU/mL为阳性;样本值> 60 AU/mL,提示幽门螺杆菌现症感染。③HP的分离培养鉴定:在胃窦部距幽门2~3 cm处胃体小弯处分别钳取黏膜组织,置无菌生理盐水中4℃保存,在4 h内接种SKirrow S选择性培养基中,置厌氧罐内,缓慢注入混合气体(5% O2、10% CO2、85% N2),37℃培养连续5 d观察结果。HP的鉴定依据主要包括:革兰染色阴性,外观呈S或弧形,生化反应结果为尿素酶试验阳性、触酶试验阳性和氧化酶试验阳性;标准菌株:幽门螺杆菌NCTC11637(CagA阳性)作为质控菌株
  1.1.3 仪器日立7170S全自动生化检测仪,每天检测前均经过校准,仪器性能稳定。
  1.2 方法
  按常规方法采取被检测者静脉血3~5 mL,分离血清,用日立全自动生化检测仪严格按照幽门螺杆菌快速测定试剂盒(比浊法)说明书操作进行HP-Ab测定试验,同时用胶体金试纸板条进行HP-Ab测定。对比这两种检测方法的结果的判定符合率。对比浊定量检测的测定值>60 AU/mL的32位体检患者作为鉴定组;另随机选择比浊定量检测的测定值介于“15~60 AU/mL”的30位体检患者作为对照组,分别进行HP的分离培养鉴定。
  1.3 统计学方法
  研究资料用SPSS 13.0进行统计分析,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,比较采用t检验,计数资料采用百分率表示,组间对比采用χ2检验。以P 60 AU/mL的32位体检患者的鉴定组和比浊定量检测的测定值介于“15~60 AU/mL”的30位体检患者的对照组分别进行HP的分离培养鉴定,结果见表2。鉴定组的HP分离培养鉴定的阳性例数、阳性率(30例,96.75%)与对照组(2例,6.67%)比较,差异有高度统计学意义(P 0.05),而胶体金法定性测定HP感染的弱阳性率明显低于比浊法定量测定HP 的弱阳性率,差异有统计学意义(P 60 AU/mL,提示幽门螺杆菌现症感染,由本研究资料表2可知:对用比浊法定量测定值>60 AU/mL的32位体检患者进行Hp的分离培养鉴定,其培养阳性率为93.75%,而对照组30位体检患者的HP培养阳性率为6.67%,两者差异有高度统计学意义(P 60 AU/mL时,可以高度提示患者机体处于现症的HP感染,可以及时对症治疗,减少HP对机体造成的伤害。
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  (收稿日期:2011-11-09本文编辑:郝明明)