[摘要] 目的 制备并测定生姜速效滴丸中总姜酚的含量，以控制其有效成分姜酚类物质。 方法 以PEG 4000和PEG 6000为（1∶2）基质，液体石蜡为冷凝液，将从鲜姜中提取纯化后的姜辣素制备成滴丸；以6-姜酚为对照品，采用铁氰化钾-三氯化铁比色法测定总姜酚，测定波长为680 nm。 结果 滴丸圆整度、硬度好，重量差异和溶散时限均符合规定。6-姜酚溶液浓度在25.6～320.0 μg/mL浓度范围内，线性关系良好。总姜酚平均含量为2.22 mg/粒。 结论 本制备方法简便可行，可用于测定鲜姜滴丸中的总姜酚含量。
[关键词] 生姜速效滴丸；制备；总姜酚；含量测定；比色法
[中图分类号] R283[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210（2012）03（c）-0045-03
Preparation and quality control of Ginger′s Extract Dropping Pills
XU LinglingLI Qunli MA JialeiWANG Yan
College of Medical, Jinhua Profession and Technology College, Zhejiang Province, Jinhua 321007, China
[Abstract] Objective To prepare Ginger′s Extract Dropping Pills and test the determination of total gingerol to control the content of effective constituents. Methods The drop-pills were prepared with Ginger′s Extract by PEG 4000 and PEG 6000 (1∶2) as matrix and liquid paraffin as cooling material. Total gingerol was detected by colourimetry of the potassium ferricyanide-ferric chloride reagent with 6-gingerol as reference substance. Detection wavelength was 680 nm. Results The drop-pills′s roundness and hardness were appropriate. The weight variation and the time limit of dissolve was accorded with the regulation. The standard curves were linear relationship at the range of 25.6-320.0 μg/mL. The average content of total gingerol in one drop-pill was 2.22 mg. Conclusion The preparation is feasible. The analysis method can be used to test the determination of total gingerol in Ginger′s Extract Dropping Pills to control the content of effective constituent. The method is simple, accurate.
[Key words] Ginger′s Extract Dropping Pills; Prepare；Total gingerol; Content determination; Colourimetry
生姜（Zingiber officinale Rosc.）是一种广泛应用的药食两用植物。生姜味辛，性热，具有发汗解表、温中止呕、温肺止咳的功效。生姜有“呕家圣药”之称，临床常用于治疗神经性呕吐、晕船晕车等晕动病呕吐、妊娠呕吐、化疗引起的呕吐等[1]。生姜具有芳香和辛辣味，姜辣素是生姜中的辛辣成分，它能刺激胃肠黏膜，使胃肠道消化能力增强，能有效地治疗寒凉食物过多而引起的腹胀、腹痛、腹泻、呕吐等[2]。姜辣素又称为姜油树脂，是以姜酚为主的系列衍生物组成的混合物，姜酚中又以6-姜酚居多[3]。为了使生姜能迅速有效地防止恶心、快速止呕，本实验将已从鲜姜中提取纯化后的姜辣素，制备成速效滴丸。与传统剂型相比，速效滴丸具有比表面积大、溶出速度快、剂量准确、生物利用度高、服用方便等特点[4]。本实验还对生姜速效滴丸进行质量控制，主要以6-姜酚为对照品，采用铁氰化钾-三氯化铁比色法，用紫外分光光度计测定总姜酚的含量，从而为质量标准的制订提供依据，促进生姜的开发及利用。
1 仪器与试药
1.1 仪器
高速药材粉碎机（浙江金华华盛实业有限公司），HH-8数显恒温水浴锅（郑州中天试验仪器有限公司），BC-8501旋转蒸发器（上海贝凯生物化工设备有限公司），自制滴丸制备装置，LB-2D智能崩解时限仪（上海黄海药检仪器有限公司），1004型电子天平（上海天平仪器厂），SP-2102UV紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司）。
1.2 试剂与药材
鲜姜（购自金华市医药公司，批号：200905）；6-姜酚标准品（天津中新药业集团股份有限公司，批号：Y-070730-6JF-M）；D-101型大孔吸附树脂（上海医药工业研究院提供），聚乙二醇4000和聚乙二醇6000（上海山浦化工有限公司），液体石蜡（天津市化学试剂公司）；乙醇和甲醇（上海诚心化工有限公司），均为分析纯；铁氰化钾（国药集团化学试剂有限公司）；三氯化铁（上海化学试剂有限公司）；水为蒸馏水。
2 方法和结果
2.1 滴丸的制备
2.1.1 生姜纯化物的制备[5]
取鲜姜冼净，绞碎；加入10倍量的95%乙醇，回流提取2次，每次30 min，提取液浓缩成稠膏，真空干燥，即得生姜粗提物。粗提物加入30%乙醇充分溶解，提取物与溶剂比为1∶120（g/mL），过滤，滤液按2 mL/min流速上样，D-101型大孔树脂柱的径高比为1∶7，先用6BV的水洗脱，再用6BV的75%乙醇洗脱，洗脱流速5 mL/min，得到75%乙醇洗脱液，减压浓缩至干，即得生姜纯化物（主要含姜辣素）。
2.1.2 载体和药物的配比的研究
选择基质分别为PEG4000和PEG6000，两者质量之比为1∶2，混合基质和药物的配比分别为18∶1，15∶1，9∶1，6∶1，3∶1，进行试验，结果当基质所占比例越大时，滴制越容易成丸，圆整度较好，当基质药物比小于9∶1时，滴丸不能成型，因此选择基质药物比为9∶1。
2.1.3 载体的选择
为选择合适的基质，分别采用PEG6000、PEG4000：PEG6000（1∶2）、PEG4000：PEG6000（1∶1）、PEG4000，基质与药物配比均为9∶1，制备滴丸，结果表明：若仅用PEG6000做基质时，药液黏度大，滴制困难；若仅用PEG4000作基质，滴后丸大小不匀且不圆整；使用混合基质PEG4000∶PEG6000（1∶2）时，药液黏度比较合适，可滴制成圆整度好的滴丸。
2.1.4 冷却剂的选择
因液体石蜡价廉、易得、安全，且不溶解主药成分，试验中选液体石蜡为冷却剂。
2.1.5 制备工艺
称取10 g生姜纯化物，加无水乙醇适量，水浴上加热溶解，并挥去乙醇；称取30 gPEG4000、60 gPEG6000于蒸发皿中，置85℃水浴上加热熔融；将药液加入基质中，边加边搅拌，混匀。再将混匀后的药液移至滴丸装置的贮液筒中，并使药液温度保持在85℃，滴距8 cm，滴入用冰水浴冷却的液体石蜡冷凝液中成丸。待冷凝完全后取出滴丸，摊于纸上，吸去滴丸表面的液体石蜡，自然干燥，包装，即得。
2.2 外观、重量差异检查及溶散时限测定
2.2.1 外观性状
制得的生姜速效滴丸外观棕黄色，表面光滑，色泽均匀，质地坚硬，味微苦。
2.2.2 重量差异
取生姜速效滴丸20粒，按照《中国药典》2010年版附录项下有关测定，测得平均粒重在0.030 g，重量差异符合滴丸剂通则中的要求。
2.2.3 溶散时限
取生姜速效滴丸6粒，按照《中国药典》2010年版附录项下有关测定，5 min内全部溶解。
2.3 滴丸总姜酚的含量测定
2.3.1 对照液及供试液的制备
2.3.1.1 6-姜酚标准溶液的制备精密称取6-姜酚对照品16 mg，置于25 mL容量瓶中，加甲醇稀释定容至刻度，摇匀即得0.64 mg/mL对照品储备液。
2.3.1.2 生姜滴丸供试品溶液的制备精密称取生姜滴丸5粒，加入80 mL无水乙醇，超声溶解后，过滤，滤液移入100 mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀即得。
2.3.1.3 阴性供试品溶液的制备称取30 g PEG 4000、60 g PEG 6000，不加生姜纯化物，按照生姜滴丸的制备工艺制备，即得不含生姜的阴性滴丸供试品。取阴性供试品5粒，加入80 mL无水乙醇，超声溶解后，过滤，滤液移入100 mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀即得。
2.3.1.4铁氰化钾-三氯化铁试液的制备分别精密量取0.6%铁氰化钾溶液和0.9%三氯化铁溶液适量，按照体积比1∶1混合，临用前现配。
2.3.2 测定方法
精密吸取对照品溶液、生姜滴丸供试品溶液、阴性供试品溶液各1 mL分别加入3个50 mL容量瓶中，以1.0 mL无水乙醇为空白，分别加入0.5 mL铁氰化钾溶液-三氯化铁试剂，边加边振荡，在暗处放5 min，再加0.1 mol/L HCl溶液定容，摇匀，放置15 min后，采用紫外-可见分光光度计在400~800 nm扫描。结果显示对照品溶液和样品溶液图谱相似，都是在680 nm处有最大吸收，而阴性供试品溶液却基本上无吸收，吸收光谱图见图1～3。因此，确定测定波长为680 nm。
2.3.3 标准曲线及线性范围
精密量取6-姜酚对照储备液，用无水乙醇稀释为25.6、32.0、64.0、80.0、128.0、160.0、320.0 μg/mL溶液，以“2.3.2”项下的测定方法测定，以吸光度为纵坐标，样品浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程Y=0.001 6X+0.024 5，r ＝ 0.999 7。结果表明6-姜酚在25.6～320.0 μg/mL浓度范围内，线性关系良好。
2.3.4 稳定性试验
取同一批供试品溶液，分别在0、5、10、15、20、30、60 min测定其吸光度，计算其RSD为0.38%，结果表明本品的供试溶液在1 h内稳定。
2.3.5 精密度试验
对同一供试品溶液连续测定5次，其RSD（%）为0.39%，表明方法的精密度能满足总酚测定要求。
2.3.6 加样回收率试验
取鲜姜滴丸9份样品适量，分别加入80 μg/mL 6-姜酚标准液1 mL，按照“2.3.1”项下供试品溶液的制备方法配制成低、中、高3个浓度的供试液，按照“2.3.2”项下的测定方法操作，测定含量，计算每个浓度的平均加样回收率，分别为97.14%、103.10%、102.00%，则9份样品平均回收率为100.75%，RSD=2.47%（n = 9），表明该方法回收率好。见表1。
2.3.7 重复性实验
取五批样品，研磨成粉，测定总姜酚的含量，结果五批样品的平均含量为2.25 mg/粒，RSD为2.89%。
2.3.8 样品总姜酚测定
将制备得到的三批滴丸样品（批号分别为090601、090602、090603）按照“2.3.2”项下进行操作，测得这三批样品中总姜酚含量分别为2.16、2.27、2.21 mg/粒，平均含量为2.22 mg/粒，RSD为2.48%。
3 讨论
3.1 生姜滴丸的优点
测得的生姜滴丸在5 min内全部溶解，说明滴丸溶出速度快，能达到迅速发挥药效的目的。这是因为滴丸的制备方法是采用固体分散制备中的熔融法，药物在基质中以微细状态存在，有利于药物溶出和吸收，能够提高药物的生物利用度。且滴丸的制备工艺简单，生产周期短，有利于工业化大生产。
3.2 制备生姜滴丸注意事项
由于生姜中的姜辣素为姜油树脂，很黏稠，不易与基质混匀，故先用少量无水乙醇溶解姜辣素，待其溶解，加热挥去乙醇，再加入熔融的基质，这样利于混匀。
本实验通过外观性状、溶散时限、重量差异以及含量测定对生姜滴丸的质量进行考察，为制订生姜速效滴丸的质量标准奠定了基础。
[参考文献]
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[2]卢传坚，欧明.姜的化学成分分析研究概述[J].中国新药与临床药理，2003，14（3）：215-217.
[3]姜子涛，李荣.姜辣素化学及其研究进展[J].食品研究与开发，1998，19（l）：7-10.
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[5]李群力，许玲玲，麻佳蕾，等.D-101型大孔吸附树脂纯化生姜中6-姜酚的研究[J].中草药，2009，40（11）：1749-1752.
（收稿日期：2011-12-01本文编辑：卫 轲）